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卻普曼瓊脂培養基原理及現象

更新時間:2025-02-14   點擊次數:451次

一、用途及原理

  該培養基用于金黃色葡萄球菌的檢測。

  蛋白胨、酵母浸粉提供細菌生長所需的基本營養,磷酸氫二鉀為緩沖劑,甘露醇為可發酵碳源,較高濃度的氯化鈉可抑制不耐鹽細菌的生長,高濃度的硫酸銨可使明膠發生沉淀析出,培養基呈不透明狀。金黃色葡萄球菌可耐高滲環境,能在此培養基中生長,將不溶性大分子的明膠分解為小分子可溶性的氨基酸,菌落周圍的培養基變為透明狀。金黃色葡萄球菌還可分解培養基中的甘露醇產酸,培養結束后,滴加酸堿指示劑可觀察產酸現象。


二、培養基配方(g/L)

蛋白胨

10.0

酵母浸出粉

2.5

磷酸氫二鉀

5.0

明膠

30.0

甘露醇

10.0

氯化鈉

55.0

硫酸銨

75.0

瓊脂

15.0

pH

7.2±0.2


三、配制方法

  稱取本品202.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15min,冷卻至45-50℃左右時,傾入無菌平皿,備用。

  注:培養基中含有較多的明膠及硫酸銨,滅菌冷卻后應搖勻立即在陰涼環境倒平板,使平板能夠快速凝固,制成的平板應為均一渾濁不透明狀態。不可長時間在50℃左右保溫,培養基易凝固;傾注平板前必須搖勻且能保證倒好的平板能快速凝固,若制成的平板呈透明狀態,通常是因培養基未搖勻或凝固過慢導致的。


四、生長現象及結果觀察

  接種以下質控菌株,在36±1℃下培養18-24小時:

質控菌株

菌株編號

生長情況

其他特征

金黃色葡萄球菌

ATCC25923

+++

菌落周圍有透明環,產酸

表皮葡萄球菌

CMCC26069

+++

菌落周圍有透明環,不產酸




表皮葡萄球菌
金黃色葡萄球菌


  發酵甘露醇產酸現象觀察:用棉簽除去平板上的菌落,在瓊脂表面滴加0.04%溴甲酚紫溶液,可同時在無菌落生長的空白位置加1滴做為對照,若滴加的溴甲酚紫變黃,說明該菌可發酵甘露醇產酸。





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